正相高效液相色谱法测定植物油中维生素E的含量

摘 要：本文利用岛津高效液相色谱仪，建立了食用油中维生素E的含量的正相高效液相色谱法。本方法参照《食品安全***标准 食品中维生素A、D、E的测定》（GB 5009.82-2016）中第二法 食品中维生素E的测定 正相高效液相色谱法，酰胺基色谱柱（150 mm ×3.0 mm,ID. 1.7 μm）为分离色谱柱，采用荧光检测器进行检测，以外标法定量。与反相高效液相色谱法相比，该方法样品前处理操作简单，重复性好，满足相关标准的要求，可用于食用油中维生素E含量的检测。

关键词：食用油 维生素E 正相高效液相色谱

技术特点：

该方法稳定性高，重复性好，实现维生素E四种异构体的有效分离。

 灵敏度高，相较于标准中10 μL的进样体积，本方案仅需进样1 μL即可满足标准要求。

1．实验部分

1.1仪器

本文使用岛津LC-20A液相色谱仪，配置信息如下：

1.2分析条件

1.3样品前处理

1.3.1试剂与标准品

正己烷、叔丁基甲基醚、四氢呋喃、甲醇（色谱纯）；乙醇中4种维生素E（α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚）混标（坛墨质检）。

1.3.2试样处理

按照下图所示流程进行样品前处理。

2.结果讨论

2.1标准色谱图

维生素E标准溶液色谱图见图1，化合物信息表见表1。

图1.维生素E标准溶液色谱图（1.00 μg/mL）

表1.化合物信息

2.2校准曲线和检出限

按照标准配置标准溶液，该标准系列中4种生育酚浓度分别为0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.00 μg/mL、2.00 μg/mL、4.00 μg/mL、6.00 μg/mL。本法采用外标法定量，以峰面积为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标绘制校准曲线，计算直线回归方程。以0.20 μg/mL标准溶液计算4种维生素E（α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚）的检出限，按照3.3倍噪声计算，4种维生素E仪器检出限为0.01～0.03 μg/mL，结果见表2，优于标准要求。

表2.线性方程、相关系数及检出限

α-生育酚 β-生育酚

γ-生育酚 δ-生育酚

图2.4种维生素E校准曲线

2.3重复性实验

取4种维生素E浓度分别为3.00 μg/mL的标准溶液平行测定6次，考察方法的精密度。结果表明保留时间RSD在0.14%~0.16%之间，峰面积RSD在2.01%~2.86%之间。结果如下表3所示，色谱图见图3。

表3.重复性实验结果（n=6）

图3.重复性实验色谱图（n=6）

2.4实际样品中生育酚的含量及组成

分别称取紫苏油毛油和小麦胚芽油毛油按照样品前处理步骤进行样品前处理取后进行分析。紫苏油毛油、小麦胚芽油毛油中4种维生素E含量如表4所示。

表4.实际样品中生育酚的含量及组成 单位：mg/100 g

图4.紫苏油毛油样品色谱图

图5.小麦胚芽油毛油样品色谱图

3．结论

本文参考《食品安全***标准 食品中维生素A、D、E的测定》（GB 5009.82-2016）中第二法 食品中维生素E的测定 正相高效液相色谱法，建立了一种测定食用油中维生素E的检测方法。该方法检测灵敏度高，重复性好，该方法满足标准要求，可供相关行业参考。